Preparare un medio arricchimento Petri Dish è un'abilità fondamentale in microbiologia, essenziale per coltivare e studiare vari microrganismi. Come fornitore di piatti di Petri, comprendo l'importanza di fornire prodotti di alta qualità e condividere conoscenze pertinenti. In questo blog, ti guiderò attraverso il processo di preparazione di una piastra di arricchimento di Petri passo dopo passo.
Comprensione dei media di arricchimento
I media di arricchimento sono formulati per incoraggiare la crescita di microrganismi specifici sopprimendo al contempo la crescita degli altri. Contengono nutrienti, fattori di crescita e agenti selettivi che favoriscono gli organismi bersaglio. Ad esempio, se sei interessato a isolare un particolare ceppo di batteri che richiede un aminoacido specifico, il terreno di arricchimento sarà integrato con quell'amminoacido.
Materiali necessari
- Piatti di Petri: Piatti di Petri di alta qualità sono fondamentali per la coltivazione di successo. Offriamo una vasta gamma diVetro da laboratorio 90 mm 100 mm da 120 mm in vetro con coperchiEPiatto di Petri in vetro da laboratorio 60mm 90 mm 100 mm Piatto di coltura cellulare con coperchiche sono realizzati in vetro premium, garantendo trasparenza e durata ottimali.
- Media di arricchimento: A seconda del microrganismo target, dovrai selezionare i media di arricchimento appropriati. È possibile acquistare un supporto pre -fatto o prepararlo da zero utilizzando singoli componenti.
- Autoclave: Questo viene utilizzato per sterilizzare i media e le piastre di Petri per prevenire la contaminazione.
- Pipette e suggerimenti: Per misurazione e trasferimento accurati di media e campioni.
- BURSEN BURNER o FORNITÀ DI CALORE: Per sterilizzare le pipette e altri strumenti durante il processo.
- Banch da lavoro sterile o cappuccio di flusso laminare: Per mantenere un ambiente sterile durante il lavoro.
Passaggio - By - Preparazione del passaggio
1. Preparare i media di arricchimento
- Pesare i componenti: Se stai realizzando i media da zero, pesare con cura ogni componente in base alla ricetta. Assicurati di utilizzare un equilibrio pulito e calibrato. Ad esempio, se i media richiedono 10 grammi di peptone, 5 grammi di estratto di lievito e 2 grammi di cloruro di sodio, misurano queste quantità con precisione.
- Sciogliere i componenti: Trasferisci i componenti pesati in un pallone o becher pulito. Aggiungere l'acqua distillata al pallone e mescolare delicatamente usando un agitatore magnetico o un'asta di vetro fino a quando tutti i componenti non sono completamente sciolti. Riscalda leggermente la miscela se necessario, ma evita il surriscaldamento.
- Regola il pH: Utilizzare un pHmetro per misurare il pH del supporto. La maggior parte dei microrganismi cresce meglio all'interno di una gamma di pH specifica. Ad esempio, molti batteri preferiscono un pH leggermente alcalino intorno a 7,2 - 7,4. Regola il pH aggiungendo piccole quantità di acido o base secondo necessità.
- Aggiungi agenti selettivi (se applicabile): Se i media di arricchimento sono progettati per selezionare un particolare gruppo di microrganismi, aggiungere gli agenti selettivi appropriati in questa fase. Ad esempio, se stai cercando di isolare i batteri Gram - negativi, è possibile aggiungere viola di cristallo o sali bilia per inibire la crescita dei batteri Gram - positivi.
2. Sterilizzare i media
- Autoclave: Trasferire il supporto preparato in contenitori appropriati, come bottiglie o boccette con vite. Allentare leggermente i tappi per consentire al vapore di fuggire durante l'autoclave. Posizionare i contenitori nell'autoclave e impostare i parametri appropriati. In generale, i media vengono autoclavati a 121 ° C per 15-20 minuti per garantire la completa sterilizzazione.
- Raffreddamento: Dopo l'autoclave, rimuovere con cura i contenitori dall'autoclave e consentire loro di raffreddare a circa 50-55 ° C. Questa temperatura è ideale per versare i media nelle piastre di Petri senza causare danni termici ai microrganismi in seguito.
3. Preparare le piastre di Petri
- Sterilizzazione: Se stai usando le nostre piastre di Petri di vetro, dovrebbero essere pre -sterilizzate. Tuttavia, è una buona pratica da raddoppiare. È possibile posizionare le piastre di Petri nell'autoclave a 121 ° C per 15-20 minuti se necessario.
- Imposta l'area di lavoro sterile: Lavorare in un ambiente sterile, come un cappuccio a flusso laminario o un banco da lavoro sterile. Pulisci l'area di lavoro con un disinfettante e accendi la luce UV per almeno 15 minuti prima di iniziare il lavoro per uccidere eventuali contaminanti nell'aria.
4. Versare i media nelle piastre di Petri
- Fiamma il collo del contenitore: Usando un bruciatore Bunsen, fiammeggia delicatamente il collo del contenitore con in mano il supporto raffreddato. Questo aiuta a impedire a eventuali contaminanti di entrare nei media quando lo versano.
- Versare i media: Apri leggermente il coperchio della piastra di Petri e versa i media nel piatto. Punta a coprire uniformemente il fondo del piatto con uno strato di media di circa 3-5 mm. Fai attenzione a non versare i media fuori dal piatto.
- Consenti ai media di solidificare: Una volta versato i media, rimettere il coperchio sulla piastra di Petri e lasciarlo indisturbare fino a quando il media si solidifica. Questo di solito richiede circa 15-30 minuti, a seconda del tipo di media.
5. Etichetta e conservare le piastre di Petri
- Etichettatura: Utilizzare un marcatore permanente per etichettare le piastre di Petri con il tipo di media, la data di preparazione e qualsiasi altra informazione pertinente, come il microrganismo target.
- Magazzinaggio: Conserva i piatti di Petri preparati in un luogo fresco e buio. Puoi impilare attentamente i piatti per risparmiare spazio. Se non stai usando immediatamente i piatti, puoi conservarli in frigorifero a 4 ° C per prolungare la loro durata di conservazione.
Risoluzione dei problemi
- Contaminazione: Se si nota qualche segnale di contaminazione, come la crescita fungina o le colonie insolite sui media, scartare le piastre di Petri interessate. Assicurati di rivedere le tue tecniche di sterilizzazione e lavorare in un ambiente più sterile la prossima volta.
- Media non consolidati: Ciò potrebbe essere dovuto a rapporti errati di componenti o autoclave insufficienti. Controlla la ricetta e assicurati di seguire correttamente le istruzioni di autoclave.
- Distribuzione dei media irregolari: Se i media non sono distribuiti uniformemente nella piastra di Petri, potrebbe essere perché il piatto non era a livello quando si versa i media. Assicurati di posizionare il piatto su una superficie piana durante il processo di versamento.
Conclusione
Preparare un mezzi di arricchimento Petri Dish è un processo dettagliato ma gratificante. Seguendo i passaggi delineati sopra e utilizzando piastre Petri di alta qualità dalla nostra fornitura, è possibile creare un ambiente ideale per coltivare e studiare i microrganismi. Che tu sia un ricercatore in un laboratorio, uno studente in una classe di microbiologia o qualcuno interessato alla cultura microbica a casa, avere gli strumenti e le conoscenze giusti è essenziale.
Se sei interessato ad acquistare le nostre piastre Petri di alta qualità per il tuo prossimo progetto, ci piacerebbe avere tue notizie. Sentiti libero di contattarci per ulteriori informazioni e per discutere le tue esigenze di approvvigionamento. Il nostro team è dedicato a fornire i migliori prodotti e servizi per soddisfare le tue esigenze.
Riferimenti
- Atlas, RM (2010). Manuale di media microbiologici. CRC Press.
- Pelczar, MJ, Chan, ECS e Krieg, NR (2007). Microbiologia: concetti e applicazioni. McGraw - Hill.